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          细胞活性定磷比色法定量检测试剂盒前的实验步骤
          点击次数1074发布日期2019-3-13 来源本站仅供参考谢绝转载否则责任自负
          实验开始前将20冰箱里的试剂盒中的试剂溶液放进冰槽里融化然后进行下列操作
          一 样品准备
          1 准?#36127;?25cm2细胞培养瓶或 60mm细胞培养皿的待测培养细胞5 X 106细胞
          2 小心加入 xx 毫升预冷的 SBJ 清理液试剂 A覆盖生长表面
          3 小心抽去清理液
          4 使用细胞刮脱棒轻柔刮脱细胞
          5 加入 xx 毫升 SBJ 清理液试剂 A混匀细胞
          6 移入到预冷的 15 毫升锥形离心管注意?#30418;?#28014;细胞从这一步骤开始
          7 放进 4台式离心机离心 5 分钟速?#20219;?300g
          8 小心抽去上清液
          9 加入 xx 微升S B J   裂解液试剂 B充分混匀
          10转?#39057;?#39044;冷的 1.5 毫升离心管
          11强力?#34892;?#38663;荡 15 秒
          12置于冰槽里孵育 30 分钟
          13放进 4微型台式离心机离心 5 分钟速?#20219;?16000g或 13000RPM
          14小心移取 500 微升上清液到新的预冷的 1.5 毫升离心管
          15移取 2  微升进行蛋白定量测定
          16即刻放进70保存或置于冰槽里继续后续操作
          二细胞活性定磷比色法定量检测试剂盒测定准备
          1 准?#36127;?#24453;测样品例如细胞裂解萃取液等置于冰槽里注意样品须澄清
          2 设定好分光光度仪温?#20219;?30棩波长为 660nm并置零
          3 准?#36127;?5 个 1.5 毫升离心管标记为 1 至 5 号管
          4 按下表分别加入S B J   阴性液试剂 D和 SBJ标准液试剂 H到每个离心管 混匀
          5 将 1 至 5 号管放进冰槽里备用避免光照标准管浓度见下表
          管号    SBJ阴性液试剂 D    SBJ 标准液试剂 H    测定体系标准磷浓度
          1                0                  xx 微升                 20 微摩尔/升
          2             xx 微升               xx 微升                 15 微摩尔/升
          3             xx 微升               xx 微升                 10 微摩尔/升
          4             xx 微升               xx 微升           5 微摩尔/升
          5             xx 微升                 0                           0
          来源上海一研生物科技有限公司
          联系电话021-69985186
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